2. GERMINACIÓN DE MAQUI

Se ha observado que el maqui se disemina endozoicamente por la ingestión del fruto por parte de las aves, lo que supone cambios en la semilla, por el efecto mecánico provocado por la molleja del ave, o químico, producto de sus jugos gástricos, y por lo tanto requeriría para su germinación de tratamientos especiales destinados a modificar la testa de la semilla.

Dentro de la recopilación bibliográfica realizada durante el proyecto, se detectó información divergente respecto de los antecedentes de germinación del Maqui. Por una parte, Rodríguez (1983) reportaba una germinación para el Maqui de 90% en base a un pretratamiento en agua y posterior aplicación de ácido giberélico.

A su vez, Molina (2001) ensayó diversos tratamientos para evaluar la germinación de Maqui, concluyendo que los tratamientos con giberelina en dosis de 2.500 y 5.000 mg/litro, fueron los más efectivos en interrumpir la dormancia en semillas de Maqui, logrando un porcentaje de germinación de 18%. Los tratamientos de escarificación con ácido sulfúrico y lavado de la semilla tanto con agua caliente como agua fría, no tuvieron efecto sobre la germinación de la semilla de Maqui.

Ante esta disparidad de información, se resolvió practicar un ensayo de germinación con semillas de la especie, a fin de ratificar la información encontrada en bibliografía.

 

Ensayos de Germinación

Se ejecutaron 2 ensayos de germinación con distintos pretratamientos, en períodos diferidos de tiempo, diferenciados fundamentalmente en el origen de la semilla. Un primer ensayo se realizó con semillas adquiridas en el Centro Productor de Semillas de Arboles Forestales dependiente de la Universidad de Chile, estas semillas eran de procedencia Frutillar, X región, cuya fecha de recolección fue el año 1999. Cabe destacar que estas eran las únicas semillas disponibles en el mercado.

Los resultados de este ensayo fueron totalmente negativos lo que impulsó a repetir la prueba de germinación con semillas recolectadas en la temporada, materializándose ensayos con semillas procedentes de Antiquina, comuna de Contulmo, VIII región y semillas procedentes de Catrico, comuna de Villarrica en la IX región.

 

2.1 Primer Ensayo de Germinación

Las semillas con las que se realizó el primer ensayo de germinación poseen las siguientes características:

·         Procedencia                                    : Frutillar, Xª región

·         Año Colecta                                    : 1999

·         Nº semillas/ kilo                               : 98.000

·         Pureza                                           : 99 %

·         Resultado ensayo de Corte                : 77 %

 

Los  materiales utilizados se desglosan a continuación:

-          4 Vasos Precipitados

-          Balanza electrónica de precisión

-          Espátulas

-          Bisturí

-          78 placas Petri

-          43,75 gr de ácido Giberélico (GibGro 20%)

-          Papel filtro

-          Ácido Sulfúrico (98%)

-          Agua destilada

-          Fungicida

 

 Instalación del ensayo

Para cada ensayo se utilizaron un total de 50 semillas por repetición, con tres repeticiones por ensayo, las que se ubicaron en placas petri con papel filtro.

Los ensayos instalados fueron los siguientes:

Ensayo Nº 1. Se tomaron un total de 500 semillas, las que se dejaron en remojo durante 7 días. Enseguida se mantuvieron en remojo durante 24 hrs  en ácido Giberélico. Posteriormente las semillas fueron lavadas y ubicadas en placas petri con papel filtro y agua, dentro de una cámara de germinación a 20 ºC, sin luz, durante 30 días. El diseño del ensayo consistió en 3 tratamientos con 3 repeticiones cada uno y 1 testigo

Ensayo Nº 2. Se tomaron un total de 1.500 semillas, las que se remojaron en ácido sulfúrico durante 1, 3 y 5 minutos, enseguida se mantuvieron en remojo durante 24 hrs  en ácido Giberélico en concentraciones de 250, 500 y 1000 mg/lt.

Posteriormente las semillas fueron lavadas y ubicadas en placas petri con papel filtro y agua, dentro de una cámara de germinación a 20 ºC, sin luz, durante 30 días. El diseño del ensayo consistió en 3 x 3  tratamientos con 3 repeticiones cada uno y 3 testigos (aplicación de tratamiento con ácido sulfúrico durante 1, 3 y 5 minutos solamente)

Ensayo  Nº 3. Se tomaron un total de 1500 semillas, las que se dejaron en remojo durante 7 días, enseguida se les aplicó un tratamiento en frío a 4 ºC durante 15, 30 y 60 días, posteriormente se mantuvieron en remojo durante 24 horas  en ácido giberélico en concentraciones de 250, 500 y 1000 mg/lt.  Posteriormente las semillas fueron lavadas y ubicadas en placas petri con papel filtro y agua, dentro de una cámara de germinación a 20 ºC, sin luz, durante 30 días.

El diseño del ensayo consistió en 3 x 3  tratamientos con 3 repeticiones cada uno y 3 testigos (aplicación de tratamiento con frío durante 15, 30 y 60 días)

 

Resultados Primer Ensayo de Germinación

Una vez efectuados los tratamientos se ubicaron las semillas en las placas petri con papel filtro, en grupos de 50 semillas por placa. Las figuras 4 y 5 muestran dos imágenes de la etapa de instalación del primer ensayo de germinación.

Fotos 4 y 5. Placas Petri en primer ensayo de germinación de Maqui, instalado en Julio de 2003

 

Los ensayos arrojaron  resultados de un 0,1 % de germinación, resultado prácticamente nulo que no corresponden a los antecedentes informados para la especie. Esto se observó para todos los tratamientos efectuados en el primer ensayo de germinación.

Los bajos valores de germinación obtenidos pueden atribuirse a  una pérdida de capacidad germinativa de las semillas a causa del año de cosecha (1999), lo que pudo haber causado la pérdida natural de la viabilidad por efecto del tiempo. Asimismo, variables de ensayo como la ausencia de luz pueden haber influido en estos resultados.

 

2.2 Segundo Ensayo Germinación

En el segundo ensayo de germinación se recolectaron semillas frescas de Maqui durante los meses de Enero y Febrero del 2004, en la oportunidad se recolectaron dos procedencias de semilla para realizar los ensayos de germinación correspondiente.

Semillas                  : Procedencia Antiquina, Comuna Contulmo, VIII región

Año recolección       : 2004

Viabilidad                : 90,38% (Según prueba de flotación)

Semillas/kilo            : 122.400

 

Semillas                  : Procedencia Catrico, Comuna Villarrica, IX región

Año recolección       : 2004

Viabilidad                : 92,4% (Según prueba de flotación)

Semillas/kilo            : 130.769

 

Los frutos de Maqui fueron secados al aire y posteriormente se les extrajo la semilla. Mediante prueba de flotación se discriminaron semillas viables para ser utilizadas en el ensayo de germinación. Previo al inicio del ensayo de germinación las semillas fueron desinfectadas con bactericida y cloro al 10%. Se realizaron cinco ensayos para cada procedencia:

Ensayo Nº 1 .Escarificación mediante remojo en agua fría durante 7 días y luego tratamiento con ácido giberélico en concentraciones de 250, 500 y 1000 mg/Lt. Las semillas fueron depositadas en vasos con agua corriente, la cual se fue cambiando diariamente. Después de 7 días, las semillas se dejaron remojar durante 24 horas en ácido giberélico en las concentraciones señaladas.

Ensayo Nº 2. Escarificación química mediante remojo en ácido sulfúrico al 95% por espacio de 5, 10 y 20 minutos. Las semillas se depositaron en una vaso precipitado y se les agregó el ácido sulfúrico durante los tiempos señalados. Luego las semillas se lavaron con agua corriente y se dejaron remojando durante 24 horas más en agua, después de lo cual se volvieron a enjuagar para iniciar el ensayo de germinación.

Ensayo Nº 3. Escarificación mecánica con lija. Las semillas utilizadas en este ensayo fueron lijadas una a una, con una lija fina para madera (grano fino 180), hasta el punto de remover parcialmente la testa de la semilla. Luego pasaron inmediatamente al proceso de ensayo de germinación.

Ensayo Nº 4. Escarificación mecánica y remojo en agua durante 7 días. Efectuada la remoción de la testa como se explicó para el ensayo 3, se remojaron las semillas durante 7 días en agua corriente, cambiando el agua diariamente. Luego se inició el ensayo de germinación respectivo.

Ensayo Nº 5. Escarificación mecánica, remojo en agua durante 7 días más tratamiento con ácido giberélico (1000 mg/Lt). Este ensayo comprende el mismo procedimiento del ensayo 4, más una aplicación final de ácido giberélico durante 24 horas.

Además se consideró una situación testigo para cada procedencia.

 

Materiales

La metodología de ensayo se realizó conforme a las recomendaciones de las Reglas Internacionales para el Ensayo de Semillas (1959). Se usaron 100 semillas por tratamiento, luego de aplicado el tratamiento pregerminativo se ubicaron las semillas en placas petri con papel filtro en grupos de 25 semillas, con esto cada ensayo contempla tres repeticiones.

Las semillas fueron ubicadas en una sala de crecimiento con temperatura controlada a  20ºC, en donde fueron expuestas a 16 horas de oscuridad y 8 horas de luz por día. Para todos los tratamientos el ensayo tuvo una duración de 30 días. El cuadro 1 muestra un resumen con los ensayos realizados.


Cuadro 1. Resumen Ensayos de Germinación en Maqui para las procedencias Antiquina y Villarrica.

 

Ensayo 1

Ensayo 2

Ensayo 3

Ensayo 4

Ensayo 5

T 1

Agua + 250 mg/lt Ac.Gib

5 min Ac.Sulfúrico

Mecánica

Mecánica + agua

Mecánica + agua + 1000 mg/lt Ac Gib

T 2

Agua + 500 mg/lt Ac. Gib

10 min Ac. Sulfúrico

 

 

 

T 3

Agua + 1000 mg/lt Ac.Gib

20 min Ac. Sulfúrico

 

 

 

Testigo

 

 

 

 

 

 

Resultados Segundo Ensayo de Germinación

Después de 30 días se dio término al ensayo de germinación para todos los tratamientos, y se procedió a la evaluación de las semillas germinadas, se consideró la semilla germinada cuando su radícula emergida alcanzó una longitud de al menos 1 mm.

En el cuadro 2 se muestran los porcentajes promedio obtenidos para el ensayo de germinación de las semillas de Maqui provenientes de la localidad de Antiquina, VIII región.

Los mejores resultados se obtuvieron en los ensayos Nº5 y Nº1, asociados ambos a un pretratamiento con ácido giberélico. Para el ensayo Nº1 se observa que a medida que aumenta la concentración de ácido giberélico (250, 500 y 1000 mg/lt) existe una mejor respuesta en la germinación. No obstante el análisis estadístico no arroja diferencia significativa para estos tratamientos (Apéndice 1).

Por su parte el ensayo Nº5, que comprende una escarificación mecánica más un tratamiento con 1000 mg/lt de ácido giberélico, resultó ser el más alto porcentaje de germinación de los ensayos con un 22%. El análisis de varianza tampoco arrojó diferencias entre los promedios de los ensayos de remojo en agua más ácido giberélico y el ensayo de escarificación mecánica más  ácido giberélico.

La escarificación química y la escarificación mecánica aplicadas independientemente no fueron efectivas en la germinación de las semillas de Maqui.

 

Cuadro 2. Porcentajes (%) promedio de Germinación para semillas de Procedencia Antiquina, VIII región.

 

En el cuadro 3, se muestran los porcentajes promedio de germinación para el ensayo efectuado con las semillas provenientes de la localidad de Catrico, IX región. La respuesta de la germinación tiene un comportamiento similar al observado en las semillas provenientes de Antiquina.

De esta forma se repiten los mejores resultados en los ensayos Nº1 y Nº 5, en los que se ocupa ácido giberélico. En el ensayo Nº1, consistente en el remojo de la semilla en agua y posterior remojo en ácido giberélico, se observa una mejor respuesta en el tratamiento Nº2, con 500 mg/lt de ácido giberélico el cual presenta un 29% de germinación.

El mismo resultado presentó el ensayo Nº5, con un 29% de germinación para el tratamiento de escarificación mecánica y remojo en 1000 mg/lt de ácido giberélico. El análisis estadístico no refleja diferencias entre las medias para estos tratamientos, con un 95% de probabilidad .


 

Cuadro 3. Porcentajes (%) promedio de Germinación para semillas de Procedencia Catrico, IX Región

 

Estos resultados concuerdan con los publicados por Molina (2001), en cuanto a la obtención de buenos resultados de germinación en Maqui con la aplicación de ácido giberélico. El mejor resultado obtenido por Molina se obtuvo con un remojo en Giberelina a una concentración de 2.500 mg/lt con el que se logró un 18% de germinación.

En el presente ensayo se obtienen mejores resultados de germinación al exponer a las semillas a un pretratamiento de remojo en agua por 7 días, más un remojo en ácido giberélico de hasta 1000 mg/lt. Es decir, se disminuye la concentración de químico a aplicar y se obtienen mejores resultados para ambas procedencias ensayadas.

La escarificación química y escarificación mecánica no fueron efectivas en estimular la germinación del Maqui.

Por otra parte no se obtuvieron los resultados informados por Rodríguez (1983), germinación de un 90% para el maqui, bajo un tratamiento de remojo en agua y aplicación de ácido giberélico.

Fotos 6 y 7. Segundo ensayo de germinación en Maqui.